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体外转录服务

服务简介

基因的体外转录是20世纪70年代发展起来的一项分子生物学和细胞生物学实验技术。体外转录是以DNA为模板,在无细胞系中在一系列转录因子的作用下经RNA聚合酶合成RNA的过程。转录合成的RNA可用于RNA结构和功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi、显微注射以及体外翻译等多方面的下游应用。

技术支持

电话:021-57072092
Email:service6@adeslaschina.com

体外转录的mRNA在5端加上帽子、3端加上polyA尾会更加稳定,使其具有编码蛋白质的功能,可以应用到疾病治疗、疫苗等领域;体外转录的RNA加上地高辛或者生物素等标记就可以作为多项实验的探针,例如:RNA原位杂交、Northern Blot、RNA Pull down等;大量体外转录的无修饰RNA也可以用于制备RNA标准品,合成tRNA、rRNA或者其他小的功能性RNA或者RNA病毒基因组、核酶等。

带有T7启动子线性化的质粒、PCR产物或者合成的DNA片段都可以作为体外转录模板,模板可用TE缓冲液或RNase-free H2O溶解,推荐浓度0.5 μg/ul。

注:以T7作为体外转录启动子时,在正向引物5‘端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性,在靶位序列前连续带有3个G,转录效率较高。

订购信息

服务项目 服务内容 周期
转录模板合成 合成或扩增DNA序列 2-4周
模板处理 质粒线性化并在序列上添加T7启动子 1-3天
体外转录 将DNA序列转录为RNA 序列 1-2周
RNA纯化和质检 检测RNA浓度和质量 1-3天

客户提供

提供样本

可以选择性地提供含目的序列的质粒、PCR产物或者DNA片段或者其他样本。

提供信息

《金赞生物体外转录服务订购表》
其他实验必须的相关资料。

最终交付

交付成品

转录的RNA产物(一般转录一次不少于80 μg RNA)

交付报告

实验报告(实验步骤和RNA质检结果)

案例

M
1

体外转录RNA:琼脂糖凝胶电泳检测结果

M:Marker;1:体外转录RNA

体外转录RNA:分光光度计检测结果

No. Sample ID ID# Sample Type SW (nm) SW Abs 260 Abs
(10 mm)
280 Abs
(10 mm)
260/280 260/230 Conc. (ng/ul)
1 My Sample 1 RNA 260 0.01 0.01 0.032 0.31 0.44 0.39
2 My Sample 2 RNA 260 19.362 19.362 10.398 1.87 1.64 774.49